豬場洗消效果的評估模型與應用分析

供稿:豬豬俠

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    豬場消毒效果如何,需要通過洗消程序評估來判斷!

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    46a672d7c4c2d63642aa2efb9a259a63_201909211152403605.jpgimage.png1bc691d97cdf554de6432c2a3b7c0453_201909211155219983.jpg  一、洗消程序評估的價值與難點

     

    西小程序評估價值

    影響洗消效果的因素

     

    洗消效果評估難點

     

    洗消程序評估難點

     

    偽狂犬病與非瘟病毒比較

     

      3.平行試驗設計

      (1)通過檢測篩選陽性污染場,檢測陽性后開展評估實驗;

      (2)20頭份的偽狂犬疫苗毒(107.5TCID50)稀釋為200毫升;

      (3)通過刷涂和噴霧制備欄舍內欄桿、墻面和地面的污染區;

      (4)靜止2h干燥(20頭份的疫苗毒可制備10平米的污染區)

      (5)洗消前,用拖布或棉布條對豬舍相關區域進行采樣保存;

      (6)用對非瘟有效的消毒劑和洗消程序對豬舍進行全面洗消;

      (7)洗消后,用拖布或棉布條對豬舍相關區域進行采樣保存;

      (8)用熒光定量PCR檢測方法,分別檢測偽狂犬疫苗毒和ASFV。

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    采樣前后比對

     

    平行試驗結果

     

      二、以病毒感染細胞實驗為基礎的評估模型的建立

      1、毒株和細胞系選擇:

      ? PRV分離株(SZ1602)107.5~8.0TCID50/0.1mL;PK-15 細胞系;

      ? PRRSV疫苗株(R98)106.5~7.0TCID50/0.1mL;Marc-145細胞系;

      2、實驗基本流程:

      病毒與消毒劑混合→感作一定時間→加入針對消毒劑的中和劑→按測定毒價的方法倍比稀釋,接種細胞→觀察細胞病變,與陽性對照比較毒價變化→通過PCR確認

      3、結果判定:

      病毒滅活率=(消毒前病毒滴度-消毒后病毒滴度)/消毒前病毒滴度*100%以病毒滅活率超過為99.99%以上做為有效的標準。

      三、以病毒感染小鼠為基礎的評估模型的建立

      1、毒株和小鼠的選擇:

      ? PRV分離株(SZ1602)107.5~8.0TCID50/0.1mL; 18~22g SPF昆明雌鼠;

      2、攻毒模型的建立:

     ?、賹?/span>49只小鼠平均分為7(6組做為攻毒組,剩余為陰性對照)

     ?、趯?/span>107.6 TCID50/0.1mL的偽狂犬病毒液倍比稀釋為六個梯度

     ?、蹖ζ渲?/span>6個實驗組進行攻毒,對照組注射100uL PBS緩沖液

      注:攻毒劑量為100uL,攻毒途徑為腹腔注射

     ?、苓B續觀察記錄10天,計算死亡率并通過PCR確診死亡原因

     

    小白鼠實驗數據

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      四、多維度影響因素的評估方法

      最大稀釋濃度:

      ?消毒劑倍比稀釋后,與病毒液感作時間30min;

      最小作用時間:

      ?以適當濃度稀釋消毒劑,分別與病毒液感5min,10min,15min,20min,25min,加中和劑終止反應;

      干擾物的影響:

      ?病毒液先與干擾物混合,再以適當濃度稀釋的消毒劑與病毒液感作30min;

      ?干擾物選擇:

     ?、僦参镉?/span>(終濃度占比20%);②牛奶(終濃度占比20%) ;③血清(終濃度占比20%);

      ?還可以針對水質、PH值、溫度等進行評價(待續)

      三、對消毒劑評估的階段性結果

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      四、消毒劑應用價值分析和總結

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    (審核編輯: 豬豬俠)

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